聚合酶链式反应(PCR)是一种用于快速增加 DNA 样本中片段数量的技术。它基于DNA的双链分裂,两个DNA链各复制一份,最终能复制出最初DNA片段的2^n倍。简言之,它使用原始DNA样本中的特异性引物(Primer)与DNA聚合酶(Polymerase),由此进行数次反复温和地加热缩写生物过程,使得特定DNA片段在非常短的时间内增殖数十倍。
PCR技术得到广泛应用,其中最为重要的是诊断用途。其他应用包括:研究药物鱼类的抗性机制;在两个物种间比较序列;检测病毒;用于核酸定量;发展药物靶标;等等。
PCR的一般过程一般是三个事件的重复循环:扩增/热板段(复制)、冷却(游离DNA链)和热启动(链复原、引物切断)。在每个周期中,温和的加热使DNA的双链分裂,冷却使引物可以结合。此时,DNA聚合酶将使用一对引物以模仿原始DNA序列进行复制。一般来说,重复此循环会使初始DNA片段增加从2^n次以上,其中n通常在25 – 30次之间变化。
PCR技术的优点在于它能够在短时间内进行DNA片段的大规模繁殖。它可以精确定位目标序列,并且可以建立大量的复制,以定性和定量分析特定DNA片段。另外,它一定程度上降低了前期准备时间及实验材料的成本,从而大大简化了实验和检测过程。
PCR技术通常被用于健康检测,以检测有某种基因突变的人,例如某些慢性病,甚至可以用它来检测有没有得某种病毒基因。因此,PCR技术在过去几年受到了广泛认可,并得到了广泛的应用。
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